Page 21 - วารสารกรมการแพทย์แผนไทยฯ ปีที่ 17 ฉบับที่ 3

J Thai Trad Alt Med Vol. 17 No. 3 Sep-Dec 2019 371

สาร andrographolide มี retention time เท่ากับ ของสาร andrographolide
3.20 นาทีและพบว่า UV spectrum มี lmax ที่ 226 จากการประมวลผลตรวจเอกลักษณ์สาร

นาโนเมตร และ mass spectrum LC-MS(ESI)(+) สำาคัญด้วยการใช้ FT-IR, NMR, DSC, UPLC และ
+
[M+H-2H O] m/z เท่ากับ 315 ดังภาพที่ 3 และ 4 ซึ่ง mass spectroscopy สามารถยืนยันได้ว่าเป็นสาร
2
สอดคล้องกับผล IR, UV และ mass spectrum ของ andrographolide มีลักษณะเป็นผงสีขาว (white
สารมาตรฐาน andrographolide USP เมื่อทดสอบที่ crystalline powder) โดยมีโครงสร้างโมเลกุล
สภาวะเดียวกัน ดังแสดงในภาพที่ 6 มีสูตรโมเลกุล C H O และมี
20 30 5
้
นอกจากนี้เมื่อตรวจด้วยเครื่อง DSC พบว่า นำาหนักโมเลกุลเท่ากับ 350.45 โดยสามารถผลิตสาร
มีจุดหลอมเหลว 230.2 C และเมื่อตรวจโดยเครื่อง andrographolide ความบริสุทธิ์สูงได้ 13 กรัมจาก
o
NMR (Bruker ADVANCE 300 spectrometer) ให้ ปริมาณฟ้าละลายโจรแห้งเริ่มต้น 7 กิโลกรัม คิดเป็น
ผลดังนี้ H NMR (CDCl , 300 MHz) δ 6.97 (1H, dt, ร้อยละผลผลิต (%yield) เท่ากับ 0.18
1
3
J = 7.0, 1.7 Hz, H-12), 5.04 (2H, br s, OH), 4.90 หลังจากตรวจเอกลักษณ์เพื่อยืนยันสารสำาคัญ
(1H, s, H-19a), 4.58 (1H, s, H-17b), 4.46 (1H, dd, J แล้ว นำาไปทดสอบหาความบริสุทธิ์ของสาร androgra-

= 10.5, 6.1 Hz, H-15a), 4.26 (1H, dd, J = 10.5, 2.0 pholide โดยวิธี UPLC ตามรายละเอียดในตารางที่
Hz, H-19a), 4.19 (1H, d, J = 11.1 Hz, H-15b), 3.48 1 พบว่าได้ความบริสุทธิ์มากกว่าร้อยละ 95 จึงนำาไป
(1H, d, J = 10.1 Hz, H-19b), 2.54 (2H, t, J = 6.5 ทดสอบความเป็นเนื้อเดียวกันของผงยา (homoge-

Hz, H-11), 2.43 (1H, brd, H-9), 1.85-1.59 (several neity testing) พบว่าผงสาร andrographolide ที่
protons), 1.30-1.22 (several protons), 0.70 (3H, ผลิตขึ้นมีความเป็นเนื้อเดียวกันของผงยา (homoge-

s, H-20) ดังแสดงในภาพที่ 5 สามารถพิสูจน์โครงสร้าง neous powder) แล้วจึงนำามาผลิตเป็นสารมาตรฐาน
ของสารจากค่าเคมีคอลชิฟต์ของโปรตอนบนคาร์บอน กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ andrographolide
ทั้ง 20 ตำาแหน่ง พบว่าสอดคล้องกับโครงสร้างโมเลกุล (Andrographolide DMSc reference standard)

ภาพที่ 3 IR spectrum ของสาร andrographolide lot no. RSC6001213