Page 18 - วารสารกรมการแพทย์แผนไทยฯ ปีที่ 17 ฉบับที่ 3
P. 18
368 วารสารการแพทย์แผนไทยและการแพทย์ ทางเลือก ปีที่ 17 ฉบับที่ 3 กันยายน-ธันวาคม 2562
(DSC) (Mettler Toledo, Switzerland) 5. นำาผลึกไปตรวจเอกลักษณ์ด้วย IR spec-
Ultra Performance Liquid Chroma- troscopy และทดสอบความบริสุทธิ์เบื้องต้นโดยหา
tograph (UPLC) (Waters , USA) ประกอบด้วย ปริมาณสาร andrographolide ด้วยวิธีวิเคราะห์โดย
®
binary solvent manager, sample manager, UPLC ซึ่งใช้ detector ชนิด diode array ร่วมกับ
diode array detector, mass spectrometer: mass spectrometer เปรียบเทียบกับสารมาตรฐาน
ACQUITY QDa detector และโปรแกรมประมวล andrographolide USP โดยวัตถุดิบที่ผลิตได้ควร
®
ผล Empower 3 มีความบริสุทธิ์ของสาร andrographolide มากกว่า
คอลัมน์ ACQUITY UPLC BEH C18 ร้อยละ 95 มี UV spectrum และ mass spectrum
®
ขนาด 2.1 x 100 มิลลิเมตร บรรจุอนุภาคขนาด 1.7 สอดคล้องกับ spectrum ของสารมาตรฐาน an-
ไมโครเมตร (Waters , USA) drographolide USP
®
4. สารเคมี 6. ทำาตามขั้นตอนที่ 3-5 ซำ้า ให้ได้สาร an-
acetonitrile (HPLC grade), methyl al- drographolide ปริมาณมากเพียงพอที่จะนำาไปผลิต
cohol (HPLC grade), ethyl alcohol (AR grade), เป็นสารมาตรฐาน
formic acid (AR grade), chloroform (AR grade), 7. ตรวจเอกลักษณ์เพื่อยืนยันสารสำาคัญ
hexane (AR grade) และความบริสุทธิ์ด้วย mass spectroscopy, IR
spectroscopy, nuclear magnetic resonance
วิธีก�รศึกษ� spectroscopy (NMR) และ differential scanning
1. การเตรียมสมุนไพรเพื่อใช้ในการผลิต calorimeter (DSC)
ทำาการตรวจเอกลักษณ์ของฟ้าทะลายโจรอบแห้งที่ 8. ทดสอบความเป็นเนื้อเดียวกันของผงสาร
ซื้อมาโดยวิธี UPLC ที่ศูนย์สารมาตรฐานยาและวัตถุ andrographolide ที่ผลิตขึ้น (homogeneity test-
[4]
เสพติดพัฒนาขึ้น หลังจากนั้นนำาไปบดและปั่นให้ ing) และประมวลผลด้วยวิธีทางสถิติ
เป็นผงละเอียด 9. ประมวลผลการทดสอบคุณสมบัติทั้งหมด
2. ทดสอบหาตัวทำาละลายที่เหมาะสมสำาหรับ และกำาหนดค่าความบริสุทธิ์แล้วนำาไปผลิตเป็นสาร
สกัดผงฟ้าทะลายโจร เพื่อให้ได้สารสกัดฟ้าทะลายโจร มาตรฐาน
ที่มีสาร andrographolide ได้ในปริมาณสูงแต่มีสาร
เจือปนอื่น ๆ ในปริมาณตำา ่ ผลก�รศึกษ�
3. นำาสารสกัดฟ้าทะลายโจรที่ได้มาทำาให้ นำาฟ้าทะลายโจรอบแห้งที่ผ่านการตรวจ
บริสุทธิ์โดยเทคนิคการตกผลึก เพื่อแยกสาร an- เอกลักษณ์ด้วยวิธี UPLC แล้ว มาบดและปั่นให้
drographolide ออกจากสารอื่นโดยใช้ตัวทำาละลาย ละเอียด นำามาสกัดด้วยตัวทำาละลายชนิดต่าง ๆ ได้แก่
และสภาวะที่เหมาะสม chloroform, hexane, methanol, ethanol, 50%
4. นำาผลึกจากข้อ 3 มาทำาการตกผลึกซำ้าเพื่อให้ ethanol นำาสารสกัดที่ได้ไปฉีดหาปริมาณสาร an-
สาร andrographolide มีความบริสุทธิ์เพิ่มขึ้น drographolide สารกลุ่ม diterpene lactones และ