Page 27 - วารสารปีที่16ฉบับที่2
P. 27
199
√–‡À¬‡æ◊ËÕ≈¥ª√‘¡“μ√ ®“°π—Èπª√—∫ª√‘¡“μ√¥â«¬ ‡À≈◊Õ 2 ¡‘≈≈‘≈‘μ√
‡¡∑“πÕ≈®π§√∫ 25 ¡‘≈≈‘≈‘μ√ ·≈⫇ª√’¬∫‡∑’¬∫º≈ °“√‡μ√’¬¡ “√≈–≈“¬¡“μ√∞“π
¢Õ߇«≈“μàÕ§«“¡ “¡“√∂„π°“√ °—¥ “√ ‚°‚æ- π” “√ ‚°‚æ‡≈∑‘π πÈ”Àπ—° 2 ¡‘≈≈‘°√—¡ ¡“
‡≈∑‘π®“°º≈¬Õ‰¥âÕ¬à“ß ¡∫Ÿ√≥å ‚¥¬°“√©’¥ “√ ≈–≈“¬„π‡¡∑“πÕ≈ª√‘¡“μ√ 5 ¡‘≈≈‘≈‘μ√
≈–≈“¬μ—«Õ¬à“߇¢â“ Ÿà√–∫∫ UPLC ·≈⫇ª√’¬∫ peak √–∫∫‚§√¡“‚∑°√“øï
area ¢Õß “√ ‚°‚æ‡≈∑‘π„π “√ °—¥∑’ˇ«≈“°“√ «—Ø¿“§§ß∑’Ë silica gel 60 GF254
°—¥μà“ß Ê «—Ø¿“§‡§≈◊ËÕπ∑’Ë ‚∑≈ŸÕ’π : ‰¥‡Õ∑‘≈Õ’‡∏Õ√å
§. °“√»÷°…“√–∫∫‚§√¡“‚∑°√“øï Õ—μ√“ à«π 2:3
‰¥â·°à §«“¡¬“«§≈◊Ëπ„π°“√μ√«®«—¥ “√ √–¬–∑“ß°“√‡§≈◊ËÕπ∑’Ë 10 ‡´π쑇¡μ√
‚°‚æ‡≈∑‘π™π‘¥¢Õß«—Ø¿“§§ß∑’Ë (stationary phase) ¢Õß«—Ø¿“§‡§≈◊ËÕπ∑’Ë
·≈–«—Ø¿“§‡§≈◊ËÕπ∑’Ë (mobile phase) °“√™– “√ ª√‘¡“μ√ “√≈–≈“¬∑’Ë„™â 10 ‰¡‚§√≈‘μ√ ”À√—∫ “√
(elution) ª√‘¡“μ√°“√©’¥ “√ Õÿ≥À¿Ÿ¡‘¢Õß√–∫∫ ≈–≈“¬μ—«Õ¬à“ß
2.2 °“√∑¥ Õ∫§«“¡„™â‰¥â¢Õß«‘∏’«‘‡§√“–Àå 2 ‰¡‚§√≈‘μ√ ”À√—∫ “√
∑”°“√∑¥ Õ∫§«“¡„™â‰¥â¢Õß«‘∏’«‘‡§√“–Àå ≈–≈“¬¡“μ√∞“π
ª√‘¡“≥ “√ ‚°‚æ‡≈∑‘π„πº≈¬Õ∑’Ëæ—≤π“¢÷Èπ μ“¡ °“√μ√«®«—¥
·π«ªØ‘∫—μ‘°“√∑¥ Õ∫§«“¡∂Ÿ°μâÕߢÕß«‘∏’«‘‡§√“–Àå 1) ¿“¬„μâ· ßÕ—≈μ√Ⓣ«‚Õ‡≈μ ∑’˧«“¡¬“«§≈◊Ëπ
∑“߇§¡’‚¥¬ÀâÕߪؑ∫—μ‘°“√‡¥’¬« °√¡«‘∑¬“»“ μ√å 254 ·≈– 365 π“‚π‡¡μ√
[11]
°“√·æ∑¬å °√–∑√«ß “∏“√≥ ÿ¢ 2) æàπ¥â«¬πÈ”¬“ anisaldehyde-H SO
2 4
[9]
3. °“√«‘‡§√“–Àåª√‘¡“≥ “√ ‚°‚æ‡≈∑‘π„πº≈ reagent ·≈â«μ√«® Õ∫¿“¬„μâ· ß∏√√¡™“μ‘·≈–
¬Õ ¿“¬„μâ· ßÕ—≈μ√Ⓣ«‚Õ‡≈μ ∑’˧«“¡¬“«§≈◊Ëπ 365
∑”°“√»÷°…“§ÿ≥¿“æ∑“߇§¡’¢Õߺ≈¬Õ‚¥¬ π“‚π‡¡μ√
«‘‡§√“–Àåª√‘¡“≥ “√ ‚°‚æ‡≈∑‘π„πº≈¬Õ ®”π«π 17 º≈°“√μ√«®‡Õ°≈—°…≥å∑“߇§¡’¥â«¬«‘∏’ TLC
μ—«Õ¬à“ß ´÷Ëß√«∫√«¡®“°·À≈àßμà“ß Ê ¥â«¬«‘∏’ ¢Õßμ—«Õ¬à“ßºß¬Õ ®”π«π 17 μ—«Õ¬à“ß æ∫ spot ¢Õß
«‘‡§√“–Àå∑’Ëæ—≤π“¢÷Èπ “√ ‚°‚æ‡≈∑‘π∑’Ë§à“ R ‡∑à“°—∫ 0.3 „π∑ÿ°μ—«Õ¬à“ß
f
´÷Ëß TLC chromatogram ¢Õߺ≈¬Õ ¥—ß· ¥ß„π
º≈°“√»÷°…“
√Ÿª∑’Ë 2
1. «‘∏’«‘‡§√“–À凙‘ߧÿ≥¿“æ¢Õߺ≈¬Õ¥â«¬«‘∏’ 2. °“√æ—≤π“«‘∏’«‘‡§√“–Àåª√‘¡“≥ “√ ‚°‚æ-
√ߧ‡≈¢º‘«∫“ß (TLC) ‡≈∑‘π„πº≈¬Õ
°“√‡μ√’¬¡μ—«Õ¬à“ß 2.1 °“√‡≈◊Õ°™π‘¥¢Õßμ—«∑”≈–≈“¬„π°“√
π”μ—«Õ¬à“ߺ≈¬Õ πÈ”Àπ—° 0.5 °√—¡ ¡“ °—¥¥â«¬ °—¥
‡¡∑“πÕ≈ 20 ¡‘≈≈‘≈‘μ√ ‚¥¬«‘∏’μâ¡ °—¥‡ªìπ‡«≈“ 20 º≈¢Õß°“√ °—¥μ—«Õ¬à“ߺ≈¬Õ 500
π“∑’ °√Õß π” “√≈–≈“¬∑’ˉ¥â¡“√–‡À¬≈¥ª√‘¡“μ√ ¡‘≈≈‘°√—¡ ¥â«¬μ—«∑”≈–≈“¬Õ‘π∑√’¬å™π‘¥μà“ß Ê