Page 19 - วารสารกรมการแพทย์แผนไทยฯ ปีที่ 16 ฉบับที่ 3

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™—Ëß‚´‡¥’¬¡‰π‰μ√∑å 5 g ≈–≈“¬¥â«¬πÈ”°≈—Ëπ 100 ml ∑¥ Õ∫§«“¡‡ªìπæ‘…μàÕ‡´≈≈凙◊ÈÕ “¬ª°μ‘ (cytotoxi-

™—ËßÕ≈Ÿ¡‘‡π’¬¡§≈Õ‰√¥å 10 °√—¡ ≈–≈“¬¥â«¬πÈ”°≈—Ëπ 100 city against vero cell) ¢Õ߇´≈≈å African green
ml ·≈–™—Ëß‚´‡¥’¬¡‰Œ¥√Õ°‰´¥å 4 g ª√—∫ª√‘¡“μ√ monkey kidney ¥â«¬«‘∏’ Green fluorescent pro-

¥â«¬πÈ”°≈—Ëπ 100 ml ‡μ√’¬¡ “√¡“μ√∞“π ™—Ëߧ“‡∑ tein (GFP)-based assay „™â Ellipticine ‡ªìπ posi-
™‘π 0.1 g ≈–≈“¬¥â«¬πÈ”°≈—Ëπ 100 ml ‡®◊Õ®“ß “√ tive control ·≈–∑¥ Õ∫§«“¡‡ªìπæ‘…μàÕ‡´≈≈å
¡“μ√∞“π„Àâ¡’§«“¡‡¢â¡¢âπ 0.1, 0.2, 0.3, 0.4 ·≈– ¡–‡√Á߇μâ“π¡ (MCF7-breast cancer) ¥â«¬«‘∏’

0.5 mg/ml Resazurin microplate assay (REMA) ‚¥¬„™â
°“√«‘‡§√“–Àå ªî‡ªμ “√μ—«Õ¬à“ß 250 μl ≈ß„π DMSO ‡ªìπ negative control ·≈–„™â Tamoxifen

À≈Õ¥∑¥≈Õß ‡μ‘¡‡Õ∑“πÕ≈ 95% 10 ml ‡μ‘¡ ·≈– Doxorubicine ‡ªìπ positive control
‚´‡¥’¬¡‰π‰μ√∑å 75 μl ∑‘È߉«â 6 π“∑’ ‡μ‘¡Õ–≈Ÿ¡‘‡π’¬¡ √“¬ß“πº≈‡ªìπ§à“ IC ‡π◊ËÕß®“°¡–‡√Á߇μâ“π¡æ∫¡“°
50
[13]
§≈Õ‰√¥å 150 μl ∑‘È߉«â 5 π“∑’ ‡μ‘¡‚´‡¥’¬¡‰Œ¥√Õ° ‡ªìπÕ—π¥—∫Àπ÷Ëß„πª√–‡∑»‰∑¬ °“√‡°‘¥¡–‡√Áß¡’
‰´¥å 0.5 ml ‡¢¬à“„À⇢⓰—π Blank ¢Õß “√ °—¥ §◊Õ “‡ÀμÿÀπ÷Ëß¡“®“°°“√¡’Õπÿ¡Ÿ≈Õ‘ √–¡“°‡°‘π‰ª
‡Õ∑“πÕ≈ 95% «—¥§à“¥Ÿ¥°≈◊π· ß∑’˧«“¡¬“«§≈◊Ëπ Õπÿ¡Ÿ≈Õ‘ √–®–®—∫°—∫¥’‡ÕÁπ‡Õ∑”„À₧√ß √â“߇°‘¥°“√
510 nm ¥â«¬‡§√◊ËÕß UV-Vis Spectrophotometer °≈“¬æ—π∏ÿå àߺ≈„À⇴≈≈å·∫àßμ—«¡“°¢÷Èπ °≈“¬‡ªìπ

√“¬ß“π„π√Ÿª·∫∫¡‘≈≈‘°√—¡¢Õߧ“‡∑™‘πμàÕ°√—¡¢Õß ¡–‡√Áß
“√ °—¥ (mg of Catechin equivalence (CE)/g
º≈°“√»÷°…“
of extract)
[12]
6. °“√À“ª√‘¡“≥°≈ÿà¡ “√·∑ππ‘π ®“°°“√§—¥‡≈◊Õ°μ”√—∫¬“À√◊Õ ¡ÿπ‰æ√∫”√ÿß
π” “√ °—¥∑’˧«“¡‡¢â¡¢âπ 1 g/ml ªî‡ªμ “√ °”≈—ß ®“°À¡Õæ◊Èπ∫â“π 11 §π ¡’μ”√—∫¬“À√◊Õ ¡ÿπ

°—¥ 0.05 ml ‡μ‘¡ Folin-Ciocalteuûs reagent 0.05 ‰æ√ 15 μ”√—∫ ª√–°Õ∫¥â«¬ ¡ÿπ‰æ√ 34 ™π‘¥ (spe-
ml ‡μ‘¡‚´‡¥’¬¡§“√å∫Õ‡πμ (Sodium carbonate) cies) “¡“√∂®”·π°‡ªìπ«ß»å (families) ¡ÿπ‰æ√
3 ml „ à≈ß„πÀ≈Õ¥∑¥≈Õß «—¥§à“¥Ÿ¥°≈◊π· ß∑’Ë à«π¡“°Õ¬Ÿà„π«ß»å Strychnaceae ·≈– Moraceae

§«“¡¬“«§≈◊Ëπ 760 nm ¥â«¬‡§√◊ËÕß UV-Vis Spec- ®”π«π 6 ™π‘¥ √Õß≈ß¡“§◊Õ«ß»å Gnetaceae ·≈–
trophotometer ‚¥¬„™â°√¥·∑ππ‘° (tannic acid) Rhamnaceae ®”π«π 4 ™π‘¥ ¥—ßμ“√“ß∑’Ë 5 ´÷Ëß∑—Èß

‡ªìπ “√¡“μ√∞“π √“¬ß“π„π√Ÿª·∫∫¡‘≈≈‘°√—¡¢Õß 15 μ”√—∫ ¡’«‘∏’°“√ª√ÿ߬“‡ªìπ°“√μâ¡‚¥¬°“√„ àπÈ”„Àâ
°√¥·∑ππ‘°μàÕ°√—¡¢Õß “√ °—¥ (mg of Tannic ∑à«¡μ—«¬“ (ª√–¡“≥ 1 ∂÷ß 2 ≈‘μ√) μâ¡®ππÈ”‡¥◊Õ¥
acid equivalence (TAE)/g of extract) 10 ∂÷ß 15 π“∑’

7. °“√∑¥ Õ∫§«“¡‡ªìπæ‘…μàÕ‡´≈≈åª°μ‘ à«π¢Õßæ◊™∑’Ëπ”¡“„™âª√–‚¬™πå æ∫«à“
·≈–°“√∑¥ Õ∫ƒ∑∏‘Ïμâ“π¡–‡√Áß ª√–°Õ∫¥â«¬ 6 à«π ‰¥â·°à ‡π◊ÈÕ‰¡â À—«À√◊Õ‡Àßâ“ ·°àπ
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ÀâÕߪؑ∫—μ‘°“√μ√«®À“ “√ÕÕ°ƒ∑∏‘Ï∑“ß™’«¿“滟π¬å §√—Èßπ’Èæ∫ ¡ÿπ‰æ√∑’Ë¡’√ ¢¡ √ ‡ºÁ¥√âÕπ √ ÀÕ¡‡¬Áπ
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