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Journal of Thai Traditional & Alternative Medicine Vol. 9 No. 2 September-December 2011 101
®“°√“¬ß“π°“√«‘®—¬ ≈”μâπ¢Õ߇∂“«—≈¬å‡ª√’¬ß∑’Ë °—¥¥â«¬ 2. ÀâÕߪؑ∫—μ‘°“√‡¿ —™«‘∑¬“ ∂“∫—π«‘®—¬ ¡ÿπ‰æ√
50% ‡Õ∑“πÕ≈ ¡’ƒ∑∏‘Ï°√–μÿâπ¿Ÿ¡‘§ÿâ¡°—π∑—Èß°“√»÷°…“„πÀ≈Õ¥ °√¡«‘∑¬“»“ μ√å°“√·æ∑¬å
∑¥≈Õß (in vitro) ·≈–„π —μ«å∑¥≈Õß (in vivo) ‡∂“«—≈¬å‡ª√’¬ß
4 5,6 «— ¥ÿ·≈– “√‡§¡’
ÕÕ°ƒ∑∏‘χ √‘¡¿Ÿ¡‘§ÿâ¡°—π ƒ∑∏‘Ïμâ“π°“√Õ—°‡ ∫ μâ“πÕπÿ¡Ÿ≈
7 8 9
Õ‘ √– ≈¥§«“¡¥—π‚≈À‘μ μâ“π‡™◊ÈÕ√“ °“√»÷°…“æ‘…‡√◊ÈÕ√—ß 1. °“√‡æ“–‡≈’Ȭ߷§≈≈— ‡∂“«—≈¬å‡ª√’¬ß
¢Õß “√ °—¥‡∂“«—≈¬å‡ª√’¬ß¥â«¬ 50% ‡Õ∑“πÕ≈„πÀπŸ¢“« 1.1 ‡¡≈Á¥‡∂“«—≈¬å‡ª√’¬ß ®“°¡À“«‘∑¬“≈—¬¡À‘¥≈
‚¥¬‰¥â√—∫ “√ °—¥¢π“¥ 6, 60 ·≈– 600 ¡°./πÈ”Àπ—°μ—« 1 °°./ «‘∑¬“‡¢μ»“≈“¬“
«—π À√◊Õ‡∑’¬∫‡∑à“ºß‡∂“«—≈¬å‡ª√’¬ß·Àâß 0.03, 0.3 ·≈– 3 °./ 1.2 §≈Õ√ÁÕ°´å 10 ‡ªÕ√凴Áπμå
πÈ”Àπ—°μ—« 1 °°./«—π À√◊Õ 1, 10 ·≈– 100 ‡∑à“¢Õß¢π“¥„™â 1.3 À¡âÕπ÷Ëß¶à“‡™◊ÈÕ
„π§πμàÕ«—π æ∫«à“‰¡à∑”„À⇰‘¥°“√‡ª≈’ˬπ·ª≈ߢÕß§à“‚≈À‘μ 1.4 ‡§√◊ËÕß«—¥§«“¡‡ªìπ°√¥‡ªìπ¥à“ß
«‘∑¬“ §à“∑“ß™’«‡§¡’¢Õß´’√—Ë¡ À√◊Õ®ÿ≈欓∏‘ ¿“æ¢ÕßÕ«—¬«– 1.5 μŸâª≈Õ¥‡™◊ÈÕ
10
¿“¬„π “√ ”§—≠„π‡∂“«—≈¬å‡ª√’¬ß∑’Ë¡’ƒ∑∏‘Ï≈¥°“√Õ—°‡ ∫·≈– 1.6 ¡’¥
μâ“πÕπÿ¡Ÿ≈Õ‘ √–‡ªìπ “√°≈ÿࡉՂ´‡ø≈‚«π (isoflavones) ‡™àπ 1.7 §’¡ (forceps)
‡®π‘ μ’Õ’π (genistein) ·≈–Õπÿæ—π∏ÿå ¡’√“¬ß“πƒ∑∏‘Ïμâ“π¡–‡√Áß 1.8 μ–‡°’¬ß·Õ≈°ÕŒÕ≈å
¢Õ߉Ղ´‡ø≈‚ÕπÀ≈“¬™π‘¥ √«¡∑—È߃∑∏‘Ïμâ“π°“√‡§≈◊ËÕπ∑’Ë¢Õß 1.9 “√‡§¡’∑’Ë„™â„π°“√‡μ√’¬¡Õ“À“√ Ÿμ√‡ÕÁ¡‡Õ
11 14
‡´≈≈å¡–‡√Áß (MS : Murashige and Skooge)
°√¡«‘∑¬“»“ μ√å°“√·æ∑¬å‰¥â»÷°…“ƒ∑∏‘Ïμâ“πÕ—°‡ ∫ 1.10 ‰§‡πμ‘π (Kinetin)
¢Õ߇∂“«—≈¬å‡ª√’¬ß ∑¥≈Õß∑“ߧ≈‘π‘°√à«¡°—∫‚√ß欓∫“≈»‘√‘√“™ 1.11 2,4 D (2,4-Dichlorophenoxyacetic acid)
6
„πºŸâªÉ«¬‚√§¢âÕ‡¢à“‡ ◊ËÕ¡ ‚¥¬‡∑’¬∫°—∫¬“μâ“πÕ—°‡ ∫𓂪√‡´π 1.12 °√¥´‘μ√‘° (citric acid)
(Naproxen) æ∫«à“‡∂“«—≈¬å‡ª√’¬ß√—°…“‚√§¢âÕ‡¢à“‡ ◊ËÕ¡‰¥â 1.13 ‰´‚μ´“π (chitosan)
¥’ ·≈– ¡’·π«‚π⡪≈Õ¥¿—¬°«à“¬“𓂪√‡´π ‡æ√“–ºŸâªÉ«¬∑’Ë 1.14 °√¥´“≈‘°‰´≈‘° (salicylic acid)
‰¥â√—∫¬“ 𓂪√‡´π ¡’Õ“°“√À‘«∫àÕ¬ · ∫∑âÕß ®ÿ°‡ ’¬¥·πàπ 2. °“√«‘‡§√“–Àåª√‘¡“≥ genistein ¢Õß·§≈≈— ‡∂“«—≈¬å
∑âÕß „π¢≥–∑’˺ŸâªÉ«¬∑’ˉ¥â√—∫ “√ °—¥‡∂“«—≈¬å‡ª√’¬ß‰¡à¡’Õ“°“√ ‡ª√’¬ß
12
¢â“߇§’¬ß¥—ß°≈à“« 2.1 ·§≈≈— ‡∂“«—≈¬å‡ª√’¬ß∫¥≈–‡Õ’¬¥®”π«π 0.50
°“√»÷°…“«‘®—¬π’È¡’«—μ∂ÿª√– ߧå‡æ◊ËÕ»÷°…“°“√‡æ“–‡≈’È¬ß °√—¡μàÕμ—«Õ¬à“ß
‡π◊ÈÕ‡¬◊ËÕæ◊™¢Õ߇∂“«—≈¬å‡ª√’¬ß‡æ◊ËÕ„À⇰‘¥·§≈≈— ·≈–À“ 2.2 °√–¥“…°√Õ߇∫Õ√å 4
ª√‘¡“≥ “√ ”§—≠„π·§≈≈— ”À√—∫°“√æ—≤𓇪ì𬓠2.3 ‰π≈Õπ‡¡¡‡∫√πøî≈‡μÕ√å (nylon membrane
¡ÿπ‰æ√·≈– “¡“√∂‡æ‘Ë¡ª√‘¡“≥°“√º≈‘μ·§≈≈— ‚¥¬„™â filter) 0.2 ‰¡‚§√‡¡μ√
13
Fermentor „πÕπ“§μ ‡π◊ËÕß®“°‡∂“«—≈¬å‡ª√’¬ßμâÕß„™â√–¬– 2.4 “√¡“μ√∞“π‡®π‘ μ’Õ‘π (genistein) (4',5,7 -
‡«≈“ª≈Ÿ°π“πÀ≈“¬ªï ®÷ßπ”¡“„™â‡ªì𬓉¥âÕ“®∑”„Àâ¡’ªí≠À“ trihydro-xyisoflavone) ¢Õß∫√‘…—∑ Sigma
‡√◊ËÕß«—μ∂ÿ¥‘∫„πÕπ“§μ 2.5 Õ–´’‚μ‰π‰μ√≈å (acetonitrile) ‡°√¥ HPLC
¢Õß∫√‘…—∑ Merck
√–‡∫’¬∫«‘∏’»÷°…“ 2.6 ‡Õ∑“πÕ≈ ‡°√¥«‘‡§√“–Àå¢Õß∫√‘…—∑ Merck
2.7 πÈ”∫√‘ ÿ∑∏‘Ï®“°°“√°√Õ߇ՓÕπÿ¿“§∑’Ë¡’ª√–®ÿÕÕ°
∂“π∑’Ë∑¥≈Õß
(deionized water)
1. ÀâÕߪؑ∫—μ‘°“√‡æ“–‡≈’Ȭ߇π◊ÈÕ‡¬◊ËÕæ◊™ ∂“∫—π«‘®—¬ ¡ÿπ 2.8 ‡§√◊ËÕß‚§√¡“‚∑√°√“øï ¡√√∂π– Ÿß (HPLC)
‰æ√ °√¡«‘∑¬“»“ μ√å°“√·æ∑¬å ¬’ËÀâÕ Waters 600 Pump √ÿàπ Waters 600 Detector √ÿàπ