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Journal of Thai Traditional & Alternative Medicine Vol. 9 No. 2 September-December 2011 111

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3. μ—«Õ¬à“߇∂“«—≈¬å‡ª√’¬ßÕâ“ßÕ‘ß DMSc Herbarium No. ‰¡‚§√≈‘μ√, 10 mM primer 1.0 ‰¡‚§√≈‘μ√ ·≈– ¥’‡ÕÁπ‡Õ
4568 ®“°æ‘æ‘∏¿—≥±åæ◊™°√¡«‘∑¬“»“ μ√å°“√·æ∑¬å μ—«Õ¬à“ß 1.0 ‰¡‚§√≈‘μ√ „πªØ‘°‘√‘¬“™ÿ¥§«∫§ÿ¡„™âπÈ”°≈—Ëπ
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2.4 ªØ‘°‘√‘¬“æ’´’Õ“√å „™â‡§√◊ËÕß GeneAmp PCR Sys-
1. °“√»÷°…“ ”√«®‡∂“«—≈¬å‡ª√’¬ß®“°·À≈àßμà“ß Ê tem 2700 (Applied Biosystems) ‚¥¬¡’ ¿“«–°“√∑”ß“π
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μ—«Õ¬à“ßÕâ“ßÕ‘ß (DMSc Herbarium No.4568) ®“° „™â‡®≈·Õ°“‚√ ∑’˧«“¡‡¢â¡¢âπ 1.8% „π “√≈–≈“¬∫—ø‡øÕ√å TBE
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scandens (Roxb.) Benth.«ß»å Fabaceae - Papilionoideae (Cambrex Bio Science Rockland, Inc.) ·≈â«·¬°·∂∫¥’
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2. °“√«‘‡§√“–Àå≈“¬æ‘¡æ奒‡ÕÁπ‡Õ Platinum by UVItec Cambridge ·≈–«‘‡§√“–Àå¢π“¥
2.1 μ—«Õ¬à“ß∑’Ë∑”°“√«‘‡§√“–Àå¡’®”π«π 20 μ—«Õ¬à“ß ¢Õß·∂∫¥’‡ÕÁπ‡Õ¥â«¬‚ª√·°√¡ UVIband version 12.11

ª√–°Õ∫¥â«¬„∫ÕàÕπ‡∂“«—≈¬å‡ª√’¬ß·™à‡¬Áπ®”π«π 19 μ—«Õ¬à“ß ‡°Á∫¢âÕ¡Ÿ≈®”π«π·≈–¢π“¥¢Õß·∂∫¥’‡ÕÁπ‡Õ∑’ˉ¥â 𔉪
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15
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2 - 3 „∫ (·≈â«·μà¢π“¥„∫) À√◊Õ‡π◊ÈÕ‡¬◊ËÕ·§≈≈— ª√–¡“≥ 5 3. °“√æ‘ Ÿ®πå‡Õ°≈—°…≥å∑“߇§¡’¥â«¬«‘∏’‚§√¡“‚∑√°√“øï
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‡À≈«≈߉ª¢≥–∫¥ μ—°·∫àßμ—«Õ¬à“ß∑’Ë∫¥·≈⫪√–¡“≥ 50 μà“ß Ê ‡ª√’¬∫‡∑’¬∫°—∫‡∂“«—≈¬å‡ª√’¬ßÕâ“ßÕ‘ß
¡‘≈≈‘°√—¡ 𔉪 °—¥¥’‡ÕÁπ‡Õ¥â«¬™ÿ¥ °—¥¥’‡ÕÁπ‡Õ®“°æ◊™ 3.1 °—¥μ—«Õ¬à“߇∂“«—≈¬å‡ª√’¬ß 1.0 °√—¡¥â«¬‡Õ∑“-
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2.3 𔥒‡ÕÁπ‡Õ∑’Ë °—¥‰¥â‰ª„™â„πªØ‘°‘√‘¬“æ’´’Õ“√å √à«¡ ‡´≈‡´’¬ ≈–≈“¬ “√∑’ˉ¥â¥â«¬‡Õ∑“πÕ≈®”π«π 3.0 ¡‘≈≈‘≈‘μ√
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‚¥¬„™â primer ®”π«π 12 primer ´÷Ëß primer M15 ‡ªìπ ´‘≈‘°“‡®≈ μ—«Õ¬à“ß≈– 5 ‰¡‚§√≈‘μ√

primer ∑’Ë¥’∑’Ë ÿ¥ ¡’≈”¥—∫‡∫ ‡ªìπ 5′-GAAT GAAT GAAT 3.2 πÈ”¬“·¬°„™â§≈Õ‚√øÕ√å¡ ‡¡∑“πÕ≈ πÈ”·≈–°√¥
GAAT-3′ ·≈–¡’ à«πº ¡¢Õߪؑ°‘√‘¬“æ’´’Õ“√å „πª√‘¡“μ√ 10 ·Õ´‘μ‘°„πÕ—μ√“ à«π 80:30:5:1
‰¡‚§√≈‘μ√ ¥—ßπ’È πÈ”°≈—Ëπ∫√‘ ÿ∑∏‘Ϫ≈Õ¥‡™◊ÈÕ 5.8 ‰¡‚§√≈‘μ√, 10X 3.3 °“√μ√«® Õ∫ π”·ºàπ´‘≈‘°“‡®≈‰ªæàπ¥â«¬

PCR buffer 1.0 ‰¡‚§√≈‘μ√, 100 mM dNTP 1.0 ‰¡‚§√≈‘μ√, “√≈–≈“¬ 20% °√¥°”¡–∂—π „π‡Õ∑“πÕ≈ ∑‘È߉«â„Àâ·Àâß